一、用途及原理

用于細(xì)菌的復(fù)合生化試驗鑒定（葡萄糖、山梨醇），常用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌生化鑒定。

蛋白胨、酵母浸粉、牛肉浸粉提供細(xì)菌生長所需的基本營養(yǎng)；氯化鈉維持滲透壓，山梨醇和葡萄糖為可發(fā)酵碳源，硫酸亞鐵和硫代硫酸鈉可檢測細(xì)菌是否產(chǎn)硫化氫，瓊脂為凝固劑，酚紅為酸堿指示劑，酸性條件下呈黃色，堿性條件下呈紅色。

培養(yǎng)基中含有少量的葡萄糖（1g/L）和較多的山梨醇（20g/L）兩種碳源，若細(xì)菌僅能發(fā)酵葡萄糖而不能發(fā)酵山梨醇，在培養(yǎng)基中產(chǎn)酸較少，在斜面處的酸受空氣氧化生成堿性物質(zhì)，pH較高顯紅色，底層少量酸不被氧化，pH下降顯黃色；若細(xì)菌能發(fā)酵山梨醇，在培養(yǎng)基中產(chǎn)生大量酸，整個培養(yǎng)基pH下降，斜面和底層均顯黃色。若細(xì)菌僅能氧化利用葡萄糖或不能利用葡萄糖，則培養(yǎng)基斜面和底層均為紅色。若細(xì)菌分解葡萄糖或山梨醇產(chǎn)氣，可觀察到氣泡或斷層現(xiàn)象。產(chǎn)硫化氫細(xì)菌可還原硫代硫酸鈉、硫酸亞鐵生成硫化氫，與培養(yǎng)基中亞鐵離子反應(yīng)生成黑色的硫化亞鐵，可觀察到底層變黑。

二、培養(yǎng)基配方（g/L）

蛋白胨

15.0

酵母浸粉

3.0

牛肉浸粉

3.0

月示蛋白胨

5.0

氯化鈉

5.0

山梨醇

20.0

葡萄糖

1.0

硫酸亞鐵

0.2

硫代硫酸鈉

0.3

瓊脂

13.0

酚紅

0.024

pH7.4±0.2

25℃

三、使用方法及注意事項

1.稱取本品65.52g，加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中，分裝至試管，121℃高壓滅菌15分鐘。

注：分裝前要保證瓊脂溶解充分，否則分裝后的試管可能不凝固。

2.滅菌結(jié)束后，趁熱將培養(yǎng)基擺高層斜面（斜面:底層=2:3），凝固后備用。

3.接種：用接種針挑取待測菌菌落，在斜面“之”字形劃線并穿刺底層，置于相應(yīng)溫度下培養(yǎng)。

注：培養(yǎng)基斜面需要與氧氣充分發(fā)生反應(yīng)，因此培養(yǎng)過程中試管必須確保使用透氣性良好的塞子，嚴(yán)禁密閉培養(yǎng)，否則可能導(dǎo)致試驗結(jié)果不正確。

4.結(jié)果觀察及記錄：培養(yǎng)結(jié)束后，記錄斜面及底層的顏色（通常紅色代表產(chǎn)堿，用“K”表示，黃色代表產(chǎn)酸，用“A”表示）、是否出現(xiàn)斷層及變黑現(xiàn)象。

四、試驗現(xiàn)象與解釋

接種以下質(zhì)控菌株，在25±1℃需氧培養(yǎng)24小時：

質(zhì)控菌株

菌株編號

生長情況

其他特征

鼠傷寒沙門氏菌

ATCC14028

+++

A/A，H2S+，產(chǎn)氣

普通變形桿菌

ATCC13315

+++

K/A，H2S+，產(chǎn)氣

小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌

CMCC52204

+++

A/A，H2S-，不產(chǎn)氣

福氏志賀氏菌

ATCC12022

+++

K/A，H2S-，不產(chǎn)氣

改良克氏雙糖鐵試驗現(xiàn)象：

試驗現(xiàn)象解釋：

鼠傷寒沙門氏菌可發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，并發(fā)酵山梨醇產(chǎn)酸，產(chǎn)硫化氫，可觀察到培養(yǎng)基整體顯黃色，有斷層，底部有變黑；

普通變形桿菌可發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，但不能發(fā)酵山梨醇產(chǎn)酸，產(chǎn)硫化氫，可觀察到培養(yǎng)基斜面紅色，底層黃色并有變黑，有斷層；

小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌可發(fā)酵葡萄糖和山梨醇產(chǎn)酸，但不產(chǎn)氣，不產(chǎn)硫化氫，可觀察到培養(yǎng)基整體顯黃色，無斷層，底層不變黑；

福氏志賀氏菌發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不能發(fā)酵山梨醇，不產(chǎn)硫化氫，可觀察到培養(yǎng)基斜面紅色，底層黃色不變黑，無斷層。

注：本文屬海博生物原創(chuàng)，未經(jīng)允許不得轉(zhuǎn)載。

專題推薦：

江門回收廢鋁

江門回收廢銅

江門回收廢鐵

江門回收廢紙

江門廢紙回收

江門廢塑料回收

江門廢銅回收

江門廢鋁回收

江門廢鐵回收

中山廢品回收

廣東廢品回收

江門廢品回收

江門起重機安裝

江門廢品站