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瓊脂糖凝膠電泳可用來(lái)PCR產(chǎn)品、血小板卵白質(zhì)因素、同工酶、免疫性復(fù)合物等物資的辨別、審定和純化。

道理：瓊脂是一種多糖，經(jīng)處置去除個(gè)中的果膠，即為瓊脂糖。瓊脂糖鏈?zhǔn)軞滏I及其余力的效率而彼此環(huán)繞產(chǎn)生繩狀瓊脂糖束，形成大網(wǎng)孔型凝膠。瓊脂糖中硫酸根離子較少，電滲感化弱，辨別功效好。

瓊脂糖凝膠電泳辨別核酸：在確定濃淡的瓊脂糖凝膠介質(zhì)中，DNA分子的電泳遷徙率與其分子量的常用對(duì)數(shù)成反比。分子構(gòu)型也對(duì)遷徙率有感化，共價(jià)閉環(huán)DNA遷徙率最快；曲線DNA次之；開環(huán)雙鏈DNA最慢。

試藥配制：核酸辨別常用緩沖液有TBE（Tris-硼酸-緩沖液）和TAE（Tris-乙酸-緩沖液）兩種，運(yùn)用時(shí)間別稀釋成1×TBE處事液或1×TAE處事液。

凝膠制備：用上述緩沖液配制0.5%～2.0%瓊脂糖凝膠溶液，滾水浴或微波爐加熱使瓊脂糖粉末熔化，冷卻至55℃時(shí)介入熒光染料至終濃淡為0.5μg/ml，而后將其注入制膠模中。

樣本制備與加樣：樣本與上樣緩沖液混勻后介入齒孔中心，每齒孔可加樣5～10μl，結(jié)果介入DNA marker以大概預(yù)算DNA片斷長(zhǎng)度。

電泳：普遍電壓為5～15V/cm，辨別大分子可用水壓5V/cm，電泳進(jìn)程倡導(dǎo)在低溫前提下舉行。

罕見(jiàn)題目領(lǐng)會(huì)與處置

條帶朦朧和條帶缺點(diǎn)和失誤是瓊脂糖電泳罕見(jiàn)題目，大概因?yàn)槿绱危?/p>

（1）樣本中含鹽量過(guò)高以及含洪量雜質(zhì)卵白均會(huì)引導(dǎo)條帶朦朧與缺點(diǎn)和失誤。

（2）DNA上樣量過(guò)大引導(dǎo)條帶朦朧。

（3）電泳緩沖液屢次運(yùn)用后，離子強(qiáng)度貶低，pH飛騰，緩沖本領(lǐng)低沉，大概使DNA電泳爆發(fā)條帶朦朧和不準(zhǔn)則的DNA帶遷徙局面。

（4）電泳時(shí)電壓不宜過(guò)大，如電壓過(guò)常會(huì)引導(dǎo)電泳溫度應(yīng)過(guò)高，小片斷DNA泳出膠外。

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