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氨基酸的紙層析 一 實驗?zāi)康?1了解并掌握氨基酸紙層析的原理和方法2學(xué)習(xí)紙層析法的操作技術(shù),分析未知樣品氨基酸的成分二 實驗原理 用濾紙為支持物進(jìn)行層析的方法,稱為紙層析法,它是分配層析法的一種紙層析所用。
Rf值就是比移值,計算方法是用你樣品點的中心處與點樣處的距離除以展開劑前沿與點樣處的垂直距離因此,Rf值是大于0小于1的一個值對應(yīng)一種物質(zhì)。
紙層析法又稱紙色譜法以紙為載體的色譜法固定相一般為紙纖維上吸附的水分,流動相為不與水相溶的有機溶劑也可使紙吸留其他物質(zhì)作為固定相,如緩沖液,甲酰胺等將試樣點在紙條的一端,然后在密閉的槽中用適宜。
防止Cu2+, Fe3+ 水解 2 形成CuCl42 等絡(luò)離子比較穩(wěn)定紙層析法又稱紙色譜法以紙為載體的色譜法固定相一般為紙纖維上吸附的水分,流動相為不與水相溶的有機溶劑也可使紙吸留其他物質(zhì)作為固定相。
在一定的條件下,某種物質(zhì)的Rf值是常數(shù)通過測定純的物質(zhì)的Rf,混合物的Rf,判斷得到其中與純的值接近的就是某純物質(zhì)了。
紙層析法是用紙作為載體的一種色譜法,原理是分裂相的在同一介質(zhì)中分散速度不同來分析的。
概念 在紙層析時通過兩次不同方向的流動相展開,以期獲得樣品的進(jìn)一步分離的方法一般是在第一次層析分離后,變換90°方向用不同的溶劑系統(tǒng)進(jìn)行第二次層析 原理 濾紙纖維的結(jié)合水為固定相,而以有機溶劑作為流動相。
紙層析法無水乙醇是溶解葉綠素用的提取葉綠體中的色素時加入無水乙醇讓色素溶解,少許碳酸鈣的目的是防止色素被破壞少許二氧化硅的作用是便于將葉片研磨成勻漿紙層析法特點濾紙纖維與水有較強的親和力,濾紙纖維能吸附25。
后來無色物質(zhì)也可利用吸附柱層析分離1944年出現(xiàn)紙層析以后層析法不斷發(fā)展,相繼出現(xiàn)氣相層析高壓液相層析薄層層析親和層析凝膠層析等層析法是利用混合物中各組分物理化學(xué)性質(zhì)的差異如吸附力分子形狀及大小。
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